人豬流感（H1N1）病例標本采集和實驗室檢測指南

　　豬流行性感冒（ h1n1病毒）病毒的檢測

　　所有豬流行性感冒（ h1n1病毒）疑似病例應(yīng)該采集上呼吸道標本來檢測豬流行性感冒（ h1n1病毒）的病毒。

　　推薦采集的呼吸道標本：

　　疾病發(fā)病后應(yīng)盡快采集如下標本：鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔沖洗液/吸取物。如果不能收集這些標本，可合并鼻拭子與口咽拭子。氣管插管的病人也應(yīng)收集氣管吸取物。標本應(yīng)置于無菌病毒運輸液（ vtm ） ，并立即用冰塊或冰排保存或置于4 ℃ （冰箱），并馬上運送至實驗室。臨床樣品收集人員及實驗室人員的感染控制指導(dǎo)請見相關(guān)文件。

　　拭子

　　理想的情況下，標本應(yīng)使用頭部為合成纖維的拭子（例如，聚酯纖維 ），用鋁或塑料做桿。不推薦棉拭子和木桿。不能用海藻酸鈣做的拭子收集標本。標本采集管應(yīng)包含3毫升病毒運輸液（例如，含有蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑，阻止細菌和真菌生長的抗生素，緩沖液） 。

　　臨床標本儲存

　　所有呼吸道標本應(yīng)保存在4℃ ，并盡快放置在-70℃。如果沒有-70℃度冰箱，標本應(yīng)保存在4℃ ，但不應(yīng)超過4天。 

　　臨床標本運輸

　　臨床標本應(yīng)按照a類包裝要求運送，并用干冰運輸。

　　所有標本應(yīng)標示清楚。疑似病例標本運送應(yīng)包含的信息請參照禽流感標本運輸。

　　檢測程序

　　呼吸道標本應(yīng)首先應(yīng)用real time rt-pcr方法檢測a型流感病毒的m基因、swine（ h1n1）的ha基因和np基因，以及質(zhì)控對照rnp基因。同時，接種mdck細胞或spf雞胚進行病毒分離，并測定病毒的全基因組序列。

　　推薦的檢測方法

　　用real-time rt-pcr方法檢測豬流行性感冒（ h1n1病毒）病毒。

　　其他檢測方法 

　　快速流感抗原檢測

　　一些商用快速檢測可以區(qū)分a和b型流感病毒 。快速檢測實驗a型流感陽性的病例符合可能病例的標準（見上文） 。這些實驗對檢測人感染豬流行性感冒（ h1n1病毒）病毒臨床標本的敏感性和特異性未知，而且檢測季節(jié)性流感病毒的靈敏度不佳。因此，快速檢測陰性結(jié)果可能是假陰性，不能作為豬流感感染的最后診斷。

　　免疫熒光法（或裝配的ifa ）

　　免疫熒光試驗可以區(qū)分a和b型流感病毒 。檢測a型流感陽性的病例符合可能病例的標準（見上文）。免疫熒光試驗的結(jié)果取決于臨床標本的質(zhì)量，操作技能，對檢測人感染豬流行性感冒（ h1n1病毒）病毒臨床標本的敏感性和特異性未知。因此，免疫熒光試驗陰性結(jié)果可能是假陰性，不能作為豬流感感染的最后診斷。

　　病毒培養(yǎng)

　　可用mdck細胞和spf雞胚分離豬流感（ h1n1病毒）病毒可以診斷感染，但無法為臨床診斷及時提供結(jié)果。病毒分離陰性并不能排除感染豬流感（ h1n1病毒）病毒。